:(1)倒置熒光顯微鏡:可以用于激光掃描共焦顯微成像或者單分子PALM顯微成像。(2)半導(dǎo)體激光:405nm激光器作為激活光,561nm激光器作為激發(fā)光,激光器波長(zhǎng)的選擇是要和使用的光活化蛋白的特性有關(guān),用于激發(fā)熒光的激光器波長(zhǎng)一般包括488、561、594、635nm。激光器功率一般在50-200mW。為了光路調(diào)節(jié)的方便,一般要求激光器輸出光斑質(zhì)量要好。(3)自由空間或光纖多波長(zhǎng)耦合器:自由空間耦合器可以使得更高功率的激發(fā)和激活激光進(jìn)入顯微鏡系統(tǒng),使得成像過(guò)程可以更快。(4)快門(mén)或AOTF(Acousto-Optic Tunable Filter聲光可調(diào)濾波器):快門(mén)或AOTF的作用是切換激 ...
熒光相機(jī)附在熒光顯微鏡上實(shí)驗(yàn)裝置用安裝有Lambert HiCAM高速攝像系統(tǒng)的熒光顯微鏡對(duì)斑馬魚(yú)進(jìn)行研究(圖2)。將魚(yú)固定在凝膠中,從下方照射。DsRed蛋白的熒光從紅細(xì)胞中發(fā)出。這種光向各個(gè)方向發(fā)射,其中一些光以相反的方向穿過(guò)激光的光路。但是,熒光通過(guò)二色鏡被定向到相機(jī)上,而不是被反射回光源。任何散射的激發(fā)光都被二色鏡反射。濾光片將去除任何背景光,只透射紅細(xì)胞熒光發(fā)出波長(zhǎng)的光。圖像傳感器將捕捉進(jìn)來(lái)的熒光。捕捉將以每秒數(shù)百或數(shù)千幀的幀率下進(jìn)行,每幀的曝光時(shí)間數(shù)量級(jí)在幾毫秒到幾毫秒的一小部分。電子倍增CCD (EMCCD)傳感器的光靈敏度足以捕捉到微弱的熒光。但它們?cè)谌直媛氏轮荒軐?shí)現(xiàn)大約10 ...
間的串?dāng)_,在熒光顯微鏡中使用四個(gè)以上探針標(biāo)記樣品具有挑戰(zhàn)性,而在共振增強(qiáng)SRS成像中,多探針標(biāo)記可以擴(kuò)展到數(shù)十個(gè)不同的探針。就多重成像而言,這種能力是一個(gè)巨大的勝利,因?yàn)樵S多細(xì)胞生物學(xué)研究需要多個(gè)分子參與者的可視化來(lái)揭示細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程和途徑。通過(guò)共振增強(qiáng)SRS提供的多路復(fù)用能力可以進(jìn)一步推動(dòng)到更低的探針濃度。通過(guò)讓探針選擇性?xún)H由SRS激發(fā)過(guò)程決定,原則上可以放寬檢測(cè)端的帶寬。這意味著在拉曼躍遷之后,分子可以在第②步中被激發(fā)到發(fā)射電子狀態(tài),允許通過(guò)熒光發(fā)射有效地檢測(cè)發(fā)色團(tuán)。如果電子躍遷以成功的拉曼躍遷為條件,則可以根據(jù)其狹窄的拉曼帶選擇發(fā)色團(tuán),同時(shí)通過(guò)熒光檢測(cè)策略提高探測(cè)靈敏度。這一過(guò)程被稱(chēng)為受激 ...
105。然而熒光顯微鏡技術(shù)可以捕捉到來(lái)自單個(gè)分子的信號(hào),即使是敏感的CRS方法也需要成千上萬(wàn)個(gè)目標(biāo)分子來(lái)產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。因此,關(guān)注提高靈敏度是擴(kuò)大CRS技術(shù)使用的重要策略。CRS成像的對(duì)比度來(lái)源于分子化合物的振動(dòng)特征。對(duì)于內(nèi)源性分子,這種標(biāo)記的數(shù)量是有限的。大量的物種和有限數(shù)量的振動(dòng)特征的結(jié)合導(dǎo)致了重疊帶結(jié)構(gòu)的密集光譜。在這種背景下識(shí)別單個(gè)物種構(gòu)成了振動(dòng)光譜學(xué)的基本挑戰(zhàn)。因此,提高CRS分子特異性的方法有機(jī)會(huì)使該技術(shù)得到更廣泛的應(yīng)用。上述這三個(gè)性能目標(biāo),高光譜成像速度,靈敏度和分子特異性,在過(guò)去十年中,已成為CRS顯微鏡領(lǐng)域發(fā)展的重要?jiǎng)恿Α8嘣斍檎?qǐng)聯(lián)系昊量光電/歡迎直接聯(lián)系昊量光電關(guān)于昊量 ...
于廣泛應(yīng)用于熒光顯微鏡的STORM或PALM方法。超分辨率拉曼成像一直是人們追求的目標(biāo),盡管目前取得了一些有趣的突破,但新的超分辨率方法的開(kāi)發(fā)仍然是該領(lǐng)域的熱點(diǎn)。與腈相比,炔標(biāo)記提供了兩倍以上的信號(hào)強(qiáng)度,并且根據(jù)炔在生物分子中的定位,其拉曼信號(hào)漂移——末端炔出現(xiàn)在約2100 cm?1處,內(nèi)部炔出現(xiàn)在約2200 cm?1處——如果選擇適當(dāng)?shù)臉?biāo)記定位組合,就可以對(duì)不同的炔標(biāo)記分子進(jìn)行多路成像。由于這些原因,炔標(biāo)記是目前應(yīng)用廣泛的拉曼標(biāo)記策略,并已被用于研究脂類(lèi)、蛋白質(zhì)、糖和核苷酸。如果您對(duì)拉曼光譜成像有興趣,請(qǐng)?jiān)L問(wèn)上海昊量光電的官方網(wǎng)頁(yè):http://www.jiazhangclub.com/thr ...
Bleedthrough還是Crosstalk,這是一個(gè)問(wèn)題以下三張放大40倍圖片是FITC標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白和Cy3標(biāo)記線粒體,并使用Lumencor SPECTRA X八通道LED顯微鏡光源對(duì)兩種熒光染料進(jìn)行激發(fā),用于顯示Bleedthrough和crosstalk的不同表現(xiàn)以及不同的解決方案。圖1.SPECTRA X 光引擎青色光通道激發(fā),485/25濾光片,Semrock LED-DA/FI/ TR/Cy5-4X四帶通多邊分束器和發(fā)射濾光片在這幅圖像中同時(shí)存在bleedthrough和crosstalk現(xiàn)象。Bleedthrough表現(xiàn)為圖像中細(xì)胞外灰度相對(duì)較高(對(duì)比圖2,已消除bleed ...
A光引擎通過(guò)熒光顯微鏡觀察水質(zhì)中藍(lán)藻和綠藻的快速方法。當(dāng)我們分析水華的成分時(shí),熒光顯微鏡比DIC相位顯微鏡更加合適。熒光顯微鏡可以利用水華細(xì)胞中的色素或熒光染料來(lái)區(qū)分不同的藻類(lèi)種類(lèi),而DIC相位顯微鏡可以顯示細(xì)胞樣品的細(xì)微結(jié)構(gòu)和凹凸變化,不太方便區(qū)分不同的藻類(lèi),當(dāng)然如果需要分辨的藻類(lèi)有明顯的形態(tài)以及結(jié)構(gòu)方面的差異同樣也可以使用。而熒光顯微鏡可以利用特定的熒光探針來(lái)檢測(cè)水華細(xì)胞中的毒素或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),從而評(píng)估水華的危害性和生理狀態(tài)。DIC相位顯微鏡雖然可以顯示細(xì)胞的三維立體影像,但對(duì)于透明或折射率差異小的樣品,其對(duì)比度和分辨率較低。對(duì)藍(lán)藻和綠藻而言,綠藻主要含有葉綠素,可以用藍(lán)光有效地激發(fā)。藍(lán)藻含有 ...
然后通過(guò)延時(shí)熒光顯微鏡監(jiān)測(cè)20小時(shí)(圖1B)。為了使GFP熒光真實(shí)地展現(xiàn)蛋白質(zhì)表達(dá)水平,穩(wěn)定且可重復(fù)的激發(fā)光源至關(guān)重要,這使得SOLA光引擎成為該應(yīng)用的理想高性能照明光源,并且低熱量與低噪聲也便于獲得更加優(yōu)質(zhì)的圖像信息。除了表征起效時(shí)間和蛋白表達(dá)速率的顯著細(xì)胞間變異性(圖1)外,LISCA還用于確定血清蛋白對(duì)不同mRNA-脂質(zhì)復(fù)合物制劑的細(xì)胞攝取的影響。圖1:(A)單個(gè)GFP表達(dá)的HuH7細(xì)胞排列在微圖纖連蛋白上。(B)代表GFP表達(dá)的單細(xì)胞熒光軌跡。灰色陰影區(qū)域表示mRNA -脂質(zhì)復(fù)合物培養(yǎng)的zui初1小時(shí)。(C) 是(B)的放大區(qū)域,顯示細(xì)胞間蛋白表達(dá)起效的變異。根據(jù)知識(shí)共享署名許可條款, ...
低分辨率。在熒光顯微鏡中,視野中的任何染料分子都會(huì)受到刺激,包括離焦平面中的染料分子。共聚焦顯微技術(shù)利用共聚焦系統(tǒng)有效地排除了焦面以外光信號(hào)的干擾,提高了分表率,實(shí)現(xiàn)了光學(xué)切片。目前,共聚焦顯微成像技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域非常重要的分析工具,借助該技術(shù),研究人員能夠?qū)?xì)胞中的特定成分進(jìn)行光學(xué)切片和三維(3D)重建。自20世紀(jì)60年代引入柔性胃腸(GI)內(nèi)窺鏡檢查以來(lái),內(nèi)窺鏡成像技術(shù)不斷取得進(jìn)步。在過(guò)去的幾十年中,內(nèi)窺鏡已被用于以微創(chuàng)或無(wú)創(chuàng)的方式觀察空腔內(nèi)部或人體內(nèi)部器官的表面,以進(jìn)行診斷或手術(shù)。目前臨床上常用的白光和窄帶光內(nèi)窺鏡無(wú)法達(dá)到細(xì)胞水平的分辨率,因此無(wú)法實(shí)現(xiàn)光學(xué)活檢,嚴(yán)重降低了診斷的準(zhǔn)確性。 ...
它們是對(duì)現(xiàn)代熒光顯微鏡、投影系統(tǒng)或激光系統(tǒng)的光學(xué)設(shè)置的補(bǔ)充。由于在光學(xué)系統(tǒng)中用非球體代替球面鏡,具有系統(tǒng)縮小的特殊優(yōu)勢(shì),可以額外減輕重量,這在航空航天領(lǐng)域起到了決定性的作用。例如,通過(guò)減輕重量,在發(fā)送地球觀測(cè)衛(wèi)星時(shí)可以降低燃料消耗。球面VS非球面zui后對(duì)比非球面鏡在成像質(zhì)量方面明顯占優(yōu)勢(shì),但這仍然反映在較高的生產(chǎn)/測(cè)量工作上,因此與球面鏡相比成本較高。然而,這被單個(gè)透鏡的節(jié)省所抵消了。下表顯示了兩種透鏡幾何形狀的比較。上海昊量光電作為Asphericon在中國(guó)大陸地區(qū)的代理商,為您提供專(zhuān)業(yè)的選型以及技術(shù)服務(wù)。對(duì)于非球面透鏡以及非球面光束整形鏡有興趣或者任何問(wèn)題,都?xì)g迎通過(guò)電話、電子郵件或者微 ...
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