區(qū)窗口多光譜熒光成像引導(dǎo)的首次人類肝臟腫瘤手術(shù)技術(shù)背景:近紅外I區(qū)熒光成像在臨床應(yīng)用中很有前景。近紅外I區(qū)窗口(NIR-I,700-900 nm)中的熒光成像相較于其它成像方式有許多優(yōu)點(diǎn),其中,高空間和時(shí)間分辨率尤為突出。它已被視為一項(xiàng)強(qiáng)大的技術(shù),并有望在各種臨床場(chǎng)景中發(fā)揮重要作用,例如,術(shù)中熒光圖像引導(dǎo)和診斷成像等。除了亞甲藍(lán)、熒光素鈉和吲哚菁綠(ICG)等幾種常規(guī)小分子近紅外染料被美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)用于臨床常規(guī)使用外,許多靶向熒光分子探針也被開發(fā)出來并正在進(jìn)行臨床評(píng)估,例如葉酸受體α靶向熒光探針葉酸-FITC、c-MET靶向光學(xué)探針GE-137和表皮生長因子受體靶向探針Cetuxi ...
光束+雙光子熒光實(shí)現(xiàn)高時(shí)空分辨率在體體積成像技術(shù)背景:活生物體的生物過程成像需要具有三維高時(shí)空分辨率率的光學(xué)顯微成像手段。如,在體腦成像需要亞微米空間分辨率區(qū)分突觸(synapses)、神經(jīng)元用來通訊和協(xié)調(diào)活動(dòng)(communicate and coordinate activity)的特定亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)等,以及亞秒級(jí)時(shí)間分辨率來追蹤神經(jīng)元活動(dòng)。盡管在一個(gè)體積內(nèi)(如跨同一神經(jīng)元的樹突)研究突觸活動(dòng)是常用的手段,但是仍然缺乏能以高時(shí)空分辨率對(duì)突觸進(jìn)行三維成像的方法。在體成像技術(shù)中,雙光子熒光顯微鏡(two-photon fluorescence microscopy, 2PFM)是對(duì)大腦這樣的不透明組 ...
金相顯微鏡或熒光鏡檢法。1. 透射式照明透射式照明方法按照其光軸方向又分中心照明和斜射照明兩種形式:(1) 中心照明:中心照明是最普遍的透射式照明法,其特點(diǎn)是照明光束的中軸與顯微鏡的光軸同在一條直線上,一般從待觀察樣品的正下方入射。它又分為臨界照明和柯勒照明兩種。圖1.臨界照明臨界照明:如上圖1,臨界照明的光源經(jīng)聚光鏡聚焦后成像在待觀察樣品上,光束狹而強(qiáng),這是它的優(yōu)點(diǎn)。但是光源的燈絲像與被檢物體的平面重合,這樣會(huì)造成待觀察樣品表面的照明不均勻,在有燈絲像的部分照明比較亮;無燈絲像的部分照明就較為暗,不僅會(huì)影響成像的質(zhì)量,更不適合顯微照相,這是臨界照明的主要缺陷。針對(duì)上述問題的解決方法是在光源的 ...
例如寬視場(chǎng)、熒光或者非線性顯微鏡等等。用于顯微鏡的高效率激光在多光子、共聚焦甚至超分辨顯微鏡中,熒光效率主要取決于激發(fā)光的質(zhì)量。Phasics AO方案能夠優(yōu)化激發(fā)光場(chǎng),讓所有光都聚焦在感興趣的區(qū)域。Phasics的傳感器分辨率相對(duì)比較高,測(cè)量的像差特征也更加完整,因此在自適應(yīng)光學(xué)中有更好的效果。改善光鑷和光活化SLM設(shè)備可以產(chǎn)生特定形狀的光斑,用于控制細(xì)胞和分子。為了能夠在產(chǎn)生最大的力量,光束應(yīng)該全部聚焦在目標(biāo)上。Phascis AO方案通過改善像差,能夠校正顯微光學(xué)元件、SLM以及激光自身像差。厚組織直接成像當(dāng)樣品需要通過比較厚的介質(zhì)時(shí),成像會(huì)比較模糊。Phasics提供了一種新的直接成像 ...
同位點(diǎn)的自發(fā)熒光,采用了 785 nm 光纖拉曼光譜。光纖拉曼光譜儀由具有 1 根激發(fā)光纖(纖芯尺寸:300 μm)的分叉光纖探頭(Emvision LLC)和 785 nm 激光二極管(FC -785-350-MM2-PC-1-0-RM,RGBLase)作為激發(fā)源耦合到光纖探頭的 1 根激發(fā)光纖,高通量光譜儀(XPE85-NIR,Nanobase)耦合到 7 根收集光纖探頭和熱電 (TE) 冷卻電荷耦合器件 (CCD)相機(jī)(iDus 401 BR-DD,Andor)獲取通過光譜儀的斯托克斯-拉曼散射光子。拉曼光譜的校準(zhǔn)是通過使用汞氖 (Hg-Ne) 校準(zhǔn)源實(shí)現(xiàn)的。我們間隔不同培養(yǎng)時(shí)間分別從患 ...
子三光子激發(fā)熒光、二次和三次諧波生成、相干拉曼反斯托克斯散射)可用作對(duì)比機(jī)制,以提供生物樣品的補(bǔ)充信息。在相干非線性顯微鏡中,信號(hào)和散射方向由激發(fā)場(chǎng)分布和樣品微觀結(jié)構(gòu)之間的相互作用產(chǎn)生,因此,定量圖像解釋需要建模描述。當(dāng)前不足:現(xiàn)有的基于角譜表示(ASR)計(jì)算聚焦點(diǎn)附近的激發(fā)場(chǎng)分布,基于格林函數(shù)(Green)將非線性響應(yīng)從聚焦區(qū)域傳播到探測(cè)器平面的模擬策略及已建立的大多數(shù)數(shù)值模型忽略了焦點(diǎn)附近樣品光學(xué)異質(zhì)性引起的場(chǎng)的失真的影響。解決方案:巴黎理工學(xué)院的Josephine Morizet和Nicolas Olivier等人將有限差分時(shí)域(FDTD)方法(FDTD已被用于模擬寬場(chǎng)、共聚焦、相襯等多 ...
能量之和滿足熒光基團(tuán)從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)的能量要求時(shí),多光子激發(fā)發(fā)生。熒光信號(hào)可以是進(jìn)入生物樣品的外源探針(Hpechst,AlexaFluor488等),也可以是內(nèi)源分子(NAD(P)H或逆轉(zhuǎn)錄熒光蛋白)。(2)多光子成像對(duì)二次諧波(Second harmonic generation, SHG)生成敏感,即兩個(gè)光子瞬間將它們的能量轉(zhuǎn)移到一個(gè)波長減半的光子上。二次諧波生成不需要熒光基團(tuán),但要求分子結(jié)構(gòu)是高度有序和特別對(duì)稱的。最常見的滿足二次諧波生成的生物結(jié)構(gòu)是膠原。(3)多光子成像是一種非線性的過程,信號(hào)產(chǎn)生要求功率密度達(dá)到MW/cm2的量級(jí)。如此量級(jí)只有在顯微物鏡的焦平面才可以達(dá)到,因而將可 ...
的溫度下進(jìn)行熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)以及膜片鉗實(shí)驗(yàn),而無需復(fù)雜笨重的孵化室。圖 3:使用 VAHEAT 對(duì)空間限制下 60°C 和 70°C 生長的嗜熱細(xì)菌進(jìn)行成像圖 4:使用 VAHEAT研究減數(shù)分裂過程中的染色體分離(酵母25- 37°C活細(xì)胞成像)圖 5:VAHEAT 用于單分子 TIRF 測(cè)量中的精確溫度控制(慕尼黑工業(yè)大學(xué) Hendrik Dietz 的實(shí)驗(yàn)室用 DNA 折紙構(gòu)建的大分子運(yùn)輸系統(tǒng))圖 6:使用 VAHEAT 表征金納米粒子擴(kuò)散常數(shù)的溫度依賴性掃 碼 預(yù) 約 試 用如果您對(duì)顯微鏡專用溫控儀有興趣,請(qǐng)?jiān)L問上海昊量光電的官方網(wǎng)頁:http://www.jiazhangclub.com/d ...
時(shí)實(shí)現(xiàn)了快速熒光成像和相位成像。人們還探索了一些改進(jìn)以提高 SPH 的性能,包括為壓縮感知選擇各種照明模式的適當(dāng)順序以及開發(fā)同軸干涉測(cè)量以提高魯棒性。當(dāng)前不足:(1)當(dāng)前實(shí)現(xiàn)全息固有的相位步進(jìn)(phase stepping)方法導(dǎo)致成像速度慢,從而通量低。(2)Lee全息圖和超像素法都是以獨(dú)立像素為代價(jià)實(shí)現(xiàn)的,因此減少了重建圖像中有效像素的數(shù)量。(3)幾乎沒有報(bào)道將 SPI/SPH 應(yīng)用于生物組織中的微觀結(jié)構(gòu)成像,這主要是由于成像系統(tǒng)的性能有限和生物樣品的散射對(duì)比度相對(duì)較低。文章創(chuàng)新點(diǎn):基于此,中山大學(xué)的Daixuan Wu(第1作者)和Zhaohui Li(通訊作者)等人提出了一種高通量的單 ...
曼信號(hào)通常被熒光輻射污染。通過對(duì)發(fā)射信號(hào)進(jìn)行時(shí)間門控,可以將拉曼信號(hào)從熒光背景中分離出來:如果短脈沖光激發(fā)分子,拉曼信號(hào)在脈沖的脈寬范圍內(nèi)發(fā)射,而熒光的壽命更長。根據(jù)這個(gè)想法可得到無熒光的拉曼光譜。但是儀器變得更復(fù)雜,且由于通過門控系統(tǒng)和光譜儀不可避免的損耗,信號(hào)的幅值顯著降低。此外通過光學(xué)元件,特別是光譜儀光柵的傳輸通常是偏振相關(guān)的。新的拉曼信號(hào)的采集和分析方法解決了這兩個(gè)障礙:相對(duì)較弱的信號(hào)水平和不消失的熒光背景。通過將采集到的拉曼信號(hào)送入足夠長的光纖中,拉曼峰可以被時(shí)間分離。通過將時(shí)間門控光電倍增管(PMT)與時(shí)間相關(guān)檢測(cè)相結(jié)合,能夠在時(shí)域內(nèi)實(shí)現(xiàn)高靈敏度的信號(hào)檢測(cè)。利用光纖的色散規(guī)律可以 ...
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